同位素內標是一種在分析化學中廣泛應用的定量分析技術,其核心原理是通過引入與目標分析物化學結構高度相似但含有穩定同位素標記(如²H、¹³C、¹?N等)的內標物,校正分析過程中的誤差,提升定量準確性。
在樣品前處理、色譜分離和質譜檢測過程中,目標分析物可能因基質效應、儀器波動、回收率差異等因素導致定量誤差。同位素內標物與目標分析物經歷相同的處理過程,其響應變化可以反映目標分析物的損失或變化,從而通過比值計算校正誤差。
化學結構相似性
同位素內標與目標分析物具有相同的化學結構,僅在部分原子(如氫、碳、氮)上被同位素取代(如氘代氫、¹³C替代¹²C)。這種相似性確保了兩者在樣品前處理、色譜分離和離子化過程中行為一致。
質譜區分性
由于同位素的質量差異,內標與目標分析物在質譜中產生可區分的離子峰(通常質量差為1-3 Da)。通過比較兩者的峰面積或峰高,可消除基質效應、儀器波動等干擾,實現準確定量。
同位素內標的優點
高準確性:
同位素內標物與目標分析物具有相同的化學性質和相似的色譜行為,能夠有效校正基質效應和儀器波動,提高定量結果的準確性。
高靈敏度:
質譜分析對同位素標記物的檢測具有高靈敏度,適用于痕量分析。
廣泛適用性:
同位素內標技術適用于多種分析方法,如液相色譜-質譜聯用(LC-MS)、氣相色譜-質譜聯用(GC-MS)等。
減少基質效應:
基質效應是分析化學中常見的干擾因素,同位素內標物能夠模擬目標分析物的行為,有效抵消基質效應的影響。